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菌B49乙醛乙醇脱氢酶基因克隆中的引物设计

论文类型 基础研究 发表日期 2008-06-01
来源 哈尔滨工业大学学报
作者 林海龙,任南琪,郑国香,张坤,段志洁
关键词 乙醛乙醇脱氢酶基因; clustalw;生物制氢细菌;简并引物
摘要 为研究乙醛乙醇脱氢酶基因及其在乙醇发酵生物制氢中的重要作用,采用clustalw对12个菌种的乙醛乙醇脱氢酶蛋白质序列进行多重比对分析,共得到6个保守区,以这6个保守区设计引物,共选用9对简并引物,命名为ADHJ1 、ADHJ2、ADHJ3、ADHJ4、ADHJ5、ADHJ6、ADHJ7、ADHJ8、ADHJ9. 用这9对引物对B49总DNA进行简并PCR,共有两对引物的扩增得到预期的结果. 其PCR产物经pMD18 - T克隆转化至大肠杆菌DH5α中,经筛选后测序. 结果表明,这两段DNA推导的氨基酸序

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