免疫磁珠分离与实时定量PCR 技术联合检测水中轮状病毒的研究
论文类型 | 基础研究 | 发表日期 | 2009-05-01 |
来源 | 环 境 科 学 | ||
作者 | 杨万,,何苗,,李丹,,施汉昌,,刘丽 | ||
关键词 | 免疫磁珠分离前处理; 实时定量PCR; 轮状病毒; 环境水样 | ||
摘要 | 建立了一种免疫磁珠分离技术联合实时定量PCR 快速定量检测水中轮状病毒的方法. 通过制备能够分离水中轮状病毒的特异免疫磁珠, 优化分离条件, 建立了免疫磁珠分离前处理方法, 并与逆转录、实时定量PCR 结合, 成功用于水中轮状病毒的检测. 研究发现, 在1 mL 水样中加入10 uL 轮状病毒免疫磁珠、0.25 uL Tween 20、孵育2 h 可达到较好的分离效果; 免疫磁珠可用于3%牛肉浸膏等常用病毒洗脱液中的轮状病毒的分离, 表明该分离技术能与已有的病毒浓集方法良好地整合. 免疫磁珠分离技术与 |
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